色谱柱的产量从2013年的309.65万根增加到2018年的378.57万根,其中液相色谱柱产量比重最大。色谱柱主要应用于生命科学、生物技术、化工、农药、食品饮料等行业。全球范围内色谱柱市场主要受制于制药工业的推动,2018年,制药工业的应用占色谱柱消费总量的32.58%。随着各领域的发展,色谱柱技术也面临着一些新的需求,包括更高的分离效率、更快的分离速度、更好的化学稳定性、更大的峰容量及更适宜的分离模式等。那么如此常见且消耗量巨大的实验室耗材,液相色谱柱在使用上有什么禁忌呢?怎样维护才能延长色谱柱的使用寿命呢?一起来了解一下吧。
液相色谱柱的七大使用禁忌
1、避免压力和温度的急剧变化
温度的突然变化或者使液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,以保持液相色谱柱内填料的稳定性。
2、避免直接改变溶剂的组成
在需要改变检测样品溶液组成时,应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。且在使用次洗脱能力强的洗脱液冲洗液相色谱柱时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50-75ml。
3、避免液相色谱柱反冲
一般来说液相色谱柱不能反冲,只有液相色谱柱使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则,反冲液相色谱柱的影响是迅速降低柱效。
4、避免流动相使用不当而破坏固定相
选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一段预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶"饱和",避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
5、禁止样品未经处理直接进入液相色谱柱
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和液相色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
6、禁止将缓冲溶液长时间存放在液相色谱柱内
保存液相色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
7、禁止液相色谱柱未经处理直接封存
液相色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡;当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗;含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触;装在液相色谱仪上的色谱柱如不经常使用,应每隔4-5天开机冲洗15分钟。
怎么样?以上液相色谱柱的七大使用禁忌,你在工作中都成功避免了么?